Análisis de PCR: ¿qué es? Cómo tomar la prueba de PCR correctamente

No hace mucho tiempo, un confiable,un método muy sensible y rápido para diagnosticar varias enfermedades infecciosas de una persona. Este método se llama "análisis de PCR". Qué es, cuál será su esencia, qué microorganismos puede revelar y cómo entregarlo correctamente, lo diremos en nuestro artículo.

Historia de descubrimiento

Inventado el método de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR)Científico estadounidense Cary Myullis en 1983. Inicialmente patentó el método de diagnóstico de la empresa "Cetus Corporation", en el que trabajó su creador. Pero en 1992, todos los derechos y patentes fueron vendidos a la empresa "Hoffman-La Roche". Después de eso, pareció que se llevaron a cabo estudios paralelos similares y fueron registrados por otros biólogos estadounidenses, como Alice Chen, David Edgar y John Treel. En 1980, los científicos soviéticos A. Slyusarenko, A. Kaledin y S. Gorodetsky abordaron este problema. Por lo tanto, era imposible determinar el único titular de derechos. Muchos bioquímicos destacados han contribuido al desarrollo del método de reacción en cadena de la polimerasa y han patentado sus innovaciones. Por el momento, el análisis de PCR se lleva a cabo en todos los lugares en laboratorios especialmente equipados.

La esencia del método de diagnóstico de PCR

Análisis de PCR: ¿qué es y cómo funciona? La esencia del método es aumentar en un medio microbiano específico mediante una enzima especial de ADN polimerasa en condiciones artificiales. Para hacer esto, multiplica el material de ADN existente. Por lo tanto, en presencia de un microorganismo patógeno en la muestra, su cantidad se incrementará a través de manipulaciones bioquímicas de laboratorio, y la bacteria puede detectarse fácilmente en un microscopio.

Análisis de PCR: ¿qué es eso?

¿Cómo se realiza la investigación material?

El análisis requiere:

  • Matriz de ADN;
  • cebadores que conectan los extremos de un fragmento de material;
  • una enzima DNA polimerasa térmicamente estable;
  • sustancias químicas que aseguran el funcionamiento adecuado de las enzimas;
  • una solución tampón necesaria para crear las condiciones apropiadas para el crecimiento y desarrollo del material de ADN.

    Análisis de PCR 12

Para llevar a cabo la PCR, se realizan de 25 a 30 repeticiones, que constan de tres etapas: desnaturalización, recocido y elongación.

Para el análisis de la reacción en cadena de la polimerasausa un dispositivo especial - un amplificador. Los equipos modernos le permiten configurar el programa necesario para calentar y enfriar los tubos para eliminar errores durante el diagnóstico.

¿Dónde se usa el diagnóstico?

El método de reacción en cadena de la polimerasa se usa en varios campos de la medicina:

  • Los científicos forenses lo usan para identificar material genético, como pelo, saliva o sangre;
  • El análisis de sangre por PCR ayuda con el genotipado, por ejemplo, para detectar una reacción individual genéticamente modificada a un fármaco específico;
  • con la ayuda de tal método establecer la existencia de lazos familiares entre las personas;
  • el método de PCR más popular se ha convertido en el diagnóstico médico para la definición de diversas enfermedades infecciosas.

¿Qué infecciones revelan PCR?

Entonces, la medicina ha utilizado con éxito el análisis de PCR. ¿Qué es? Ya aprendimos. ¿Y qué patógenos se pueden detectar con él? Las siguientes enfermedades infecciosas se diagnostican mediante PCR:

  • hepatitis A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • Candidiasis;
  • clamidia;
  • micoplasmosis;
  • gardnerellez;
  • mononucleosis infecciosa;
  • tricomoniasis;
  • infección por papilomavirus;
  • tuberculosis;
  • infección por herpes de los tipos 1º y 2º;
  • Helicobacteriosis;
  • citomegalovirus;
  • difteria;
  • salmonelosis;
  • Infección por VIH

    Análisis de PCR para VIH

Además, los métodos de PCR se usan en el diagnóstico de cáncer.

Ventajas

Diagnóstico PCR tiene varias ventajas:

  1. Alta sensibilidad Incluso con unas pocas moléculas de ADN del microorganismo, el análisis de PCR determina la presencia de infección. El método ayudará en enfermedades crónicas y latentes. A menudo, en tales casos, el microorganismo no se cultiva de otras maneras.
  2. Para el estudio, cualquier material, como saliva, sangre, sexo, pelo, células epiteliales, es adecuado. El más común es un análisis de sangre y un frotis urogenital en la PCR.

    PCR: tomar la prueba

  3. No requiere cultivo de cultivos a largo plazo. El proceso de diagnóstico automatizado le permite obtener los resultados del estudio después de 4-5 horas.
  4. El método es casi 100% confiable. Solo se registraron casos únicos de un resultado falso negativo.
  5. La capacidad de identificar varios tipospatógenos de una sola muestra de material. Esto no solo acelera el proceso de diagnóstico de la enfermedad, sino que también reduce significativamente los costos de material. A menudo, el médico prescribe un análisis integral de PCR. El precio del examen, que consiste en la definición de seis patógenos, es de aproximadamente 1500 rublos.

Recomendaciones para prepararse para el análisis

Para que los resultados sean confiables en el estudio de PCR, el análisis debe realizarse siguiendo las recomendaciones para la preparación preliminar para el diagnóstico:

  1. Antes de abandonar la saliva, debe abstenerse de tomar alimentos y medicamentos 4 horas antes de tomar el material. Inmediatamente antes del procedimiento, enjuague su boca con agua hervida.
  2. Las reglas anteriores se deben seguir al tomar una muestra de la superficie interna de la mejilla. Después del enjuague, se recomienda realizar un ligero masaje cutáneo para aislar la secreción de la glándula.
  3. La orina generalmente se cosecha en casa. Para hacer esto, necesitas llevar a cabo un baño completo de los genitales. Es necesario recolectar 50-60 ml de orina en un recipiente de plástico estéril. Para garantizar la pureza del material, se recomienda que las mujeres inserten un tampón en la vagina y que los hombres tiren al máximo de la piel. No puedes tomar el material durante el flujo menstrual.
  4. Para la esperma debes abstenerte de tener relaciones sexualesActúe durante 3 días antes de la recolección. Además, los médicos aconsejan negarse a visitar la sauna y tomar un baño caliente, beber alcohol y comida picante. 3 horas antes de la prueba, debe abstenerse de orinar.
  5. Para la entrega de frotis urogenital, por ejemplo sise lleva a cabo un análisis de Chlamydia PCR, tanto mujeres como hombres se recomiendan el descanso sexual durante 3 días. 2 semanas antes de la prueba, no se deben tomar medicamentos antibacterianos. Durante una semana, debe dejar de usar geles íntimos, ungüentos, supositorios vaginales, jeringas. 3 horas antes de la prueba, debe abstenerse de orinar. Durante la menstruación, la recolección de material no se lleva a cabo, solo después de 3 días después del cese de la descarga de la sangre puede tomarse un frotis urogenital.

PCR durante el embarazo

En el período de espera del bebé muchos infecciososLas enfermedades de transmisión sexual son extremadamente peligrosas para el desarrollo normal del feto. Las ETS pueden provocar retraso del crecimiento intrauterino, abortos espontáneos o nacimientos prematuros, malformaciones congénitas del niño. Por lo tanto, es extremadamente importante pasar una prueba temprana de PCR. Es necesario enviar el análisis al registrarse, hasta 12 semanas.

Análisis de Chlamydia PCR

El material de la cerca se origina en el canal cervicalcon la ayuda de un cepillo especial. El procedimiento es indoloro y no representa un peligro para el bebé. Por lo general, durante el embarazo, la clamidia se analiza por el método de PCR, así como por ureaplasmosis, micoplasmosis, citomegalovirus, herpes y virus del papiloma. Tal complejo de exámenes se llama PCR-6.

PCR para el diagnóstico de VIH

En relación con el hecho de que el método de reacción en cadena de la polimerasala reacción es muy sensible a los cambios en el cuerpo y las condiciones del diagnóstico, muchos factores pueden afectar el resultado. Por lo tanto, el análisis de PCR para la infección por VIH no es un método confiable, su eficacia es del 96-98%. En el 2-4% restante de los casos, la prueba arroja resultados falsos positivos.

Pero en algunas situaciones sin diagnóstico de PCR del VIHno para administrar Por lo general, se administra a personas con un resultado de ELISA falso negativo. Dichos indicadores indican que la persona aún no ha desarrollado anticuerpos contra el virus y que no pueden ser detectados sin un aumento múltiple en el número. Esto se puede lograr realizando una prueba de sangre usando un método de PCR.

Además, este diagnóstico es necesario para los niños del primer año de vida que nacen de una madre con VIH. El método es la única forma de determinar de manera confiable el estado de un niño.

PCR para el diagnóstico de hepatitis

El método de reacción en cadena de la polimerasa permitedetectar el ADN del virus de la hepatitis A, B, C mucho antes de la formación de anticuerpos contra la infección o la aparición de los síntomas de la enfermedad. Particularmente efectivo es el análisis de la PCR para la hepatitis C, ya que en el 85% de los casos dicha enfermedad se produce de forma asintomática y sin un tratamiento oportuno pasa a una fase crónica.

Prueba de sangre de PCR

La detección oportuna del patógeno ayudará a evitar complicaciones y un tratamiento prolongado.

Encuesta integral de PCR

Análisis complejo de PCR: ¿qué es?Esta reacción método de ensayo polimezarnoy cadena que incluye determinar simultáneamente varias infección especies: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, citomegalovirus, urealitikum ureaplasma, herpes primero y segundo tipo, la gonorrea papilomavirus. El precio de tales diagnósticos oscila entre 2000 y 3500 rublos. dependiendo de la clínica, materiales y equipos, así como en el tipo de análisis: cualitativa o cuantitativa. Lo que es necesario en su caso: el médico decidirá. En algunos casos, es simplemente detectar la presencia del patógeno en otros, como el VIH, el importante papel desempeñado por título cuantitativa. se refiere como "análisis de PCR de 12" en el diagnóstico de todos los patógenos examen anteriormente.

Explicación de los resultados del análisis

La decodificación del análisis de PCR no es difícil.Solo hay 2 escalas del indicador: "resultado positivo" y "resultado negativo". Si se detecta un patógeno, los médicos pueden confirmar la presencia de la enfermedad con un 99% de confianza y proceder con el tratamiento del paciente. En el método cuantitativo para determinar la infección en la columna correspondiente, se indicará el valor numérico de las bacterias detectadas. Solo un médico puede determinar el grado de la enfermedad y prescribir el tratamiento necesario.

¿Dónde pasar el análisis de PCR?

En algunos casos, por ejemplo, al determinarInfección por VIH por el método de PCR, con un resultado negativo, se hace necesario realizar exámenes adicionales para confirmar los resultados.

¿Dónde tomar el análisis?

Dónde enviar el análisis de PCR:en el policlínico estatal o en un laboratorio privado? Desafortunadamente, en las instituciones médicas municipales, los equipos y métodos a menudo están desactualizados. Por lo tanto, es mejor dar preferencia a los laboratorios privados con equipo moderno y personal altamente calificado. Además, en una clínica privada obtendrás resultados mucho más rápido.

En Moscú, muchos laboratorios privados ofrecenrealizando análisis de PCR en diversas infecciones. Por ejemplo, en clínicas como Vita, Complex Clinic, Happy Family y Uro-Pro, se realiza un análisis de PCR. El precio del examen es de 200 rublos. para la definición de un patógeno

Se puede concluir que el diagnóstico de infecciónLa PCR en la mayoría de los casos es una forma rápida y confiable de detectar el patógeno en el cuerpo en las primeras etapas de la infección. Pero en ciertos casos vale la pena elegir otros métodos de diagnóstico. La necesidad de realizar dicho estudio solo puede ser determinada por un especialista. La decodificación del análisis de PCR también requiere un enfoque profesional. Siga las recomendaciones del médico y no realice pruebas usted mismo, que no son necesarias.

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